在单细胞组学的研究中，揭示细胞群体的异质性、识别单个细胞的独特性，以及关注少数亚群体等方面都发挥了至关重要的作用，近年来这一领域受到了越来越多的重视。蛋白质，作为生命活动的直接执行者，因氨基酸组成、可变剪切以及翻译后修饰等多种因素而展现出丰富的多样性。在蛋白质层面揭示生理活动的复杂性和多样性，正逐渐成为探索生命过程的新焦点。

随着单细胞RNA测序技术的突破，我们如今能在单细胞层面对基因组和转录组进行深入研究。高通量单细胞转录组测序技术不仅揭示了细胞之间的异质性，还结合了传统群体研究中发现的共性，这使我们能够更全面地理解细胞的功能和调控机制。然而，由于遗传物质与蛋白表达量之间并不是一一对应的定量关系，单细胞转录组数据虽然能提供基因表达信息，却无法直接推导出蛋白质内容的变化。因此，开展单细胞蛋白质组学研究显得尤为必要和迫切。这一领域可以提供每个细胞中蛋白质及其翻译后修饰的定量信息，使我们得以全新方式解析生命活动的奥秘。

近年来，随着样品前处理技术和色谱质谱联用仪器性能的进步，单细胞蛋白质组学研究取得了巨大的发展。2018年，RaynTKelly团队利用nanoPOTS技术减少样本损耗，在单细胞中鉴定超过600个蛋白质。2020年，ZhuYing团队结合荧光激活细胞分选和串联质谱标签，成功从单细胞中鉴定了超过1716个蛋白质。2023年，KarlMechtler团队利用CellenONE平台和proteoCHIP芯片，在Orbitrap系统上实现了单细胞1940个蛋白质的鉴定。而进入2024年，浙江大学团队利用微流控技术开发的PiSPA单细胞分选技术，成功在单个哺乳动物细胞中检测到最多3000个蛋白质。类似的技术进步不断推动着□单细胞蛋白质组学的发展，使我们能够以前所未有的视角探讨生物学问题。

尽管单细胞层面蛋白质的检测技术在不断进步，但由于翻译后修饰的丰度极低，目前对其进行大规模分析仍面临着诸多挑战。因此，本文将介绍两项单细胞翻译后修饰鉴定的优秀研究，以为相关研究提供助力。

第一篇文章来自于丹麦哥本哈根大学的JesperVOlsen团队。在这一研究中，作者开发了一种近乎无损的单细胞蛋白质组工作流程，采用名为proteoCHIPEVO96的芯片，能够在纳升级别的体积下并行制备多达96个单细胞样品。通过这一方法，作者实现了在单个HeLa细胞中鉴定5204种蛋白质，并在某次实验中辨识出了超过6000种蛋白质。此外，作者还统计了不同亚细胞定位蛋白的鉴定结果，验证了该方法的稳健性。

第二篇文章聚焦于基于TMT标签的同位素标记定量方案SCoPE-MS，这一方法显著提高了单细胞蛋白质组分析的灵敏度和通量。Slavov团队在2018年可能率先提出该方案，通过将单细胞样本信号与大量细胞的TMT载体相结合，从而提升了肽段鉴定的效率。考虑到N-糖基化在肿瘤微环境和免疫治疗中的关键作用，研究者利用该策略深入分析了N-糖肽的鉴定效果，从而提升了对单细胞中N-糖基化模式变化的理解。

综上所述，随着单细胞样品前处理技术的发展以及高端质谱检测器的持续进步，进行翻译后修饰的分析已变得愈加可行，相关研究也为我们深入探索生命科学的奥秘、推动相关疾病的治疗提供了新的思路与工具。在这一过程中，人生就是博，让我们携手突破科学的边界，探索生命的真正秘密！